Sebutkan dan Jelaskan empat macam fungsi gen yang dapat dipergunakan dalam teknologi hibridoma

Perhatikan daur Hidrologi tersebut !. Peristiwa yang ditunjuk pada nomor 1 dan 4 secara berurutan adalah...a. transpirasi dan evaporasib. kondensasi d … an presipitasi c. kondensasi dan transpirasi d. evaporasi dan respirasi e. evaporasi dan transpirasi ​

Pernyataan berikut tidak benar mengenai produsen adalah.... a. memanfaatkan energy cahaya matahari b. mampu menyusun senyawa anorganik dari organik c. … bersifat autotrof d. hasil zat makanan diambil oleh organisme laine. membutuhkan senyawa anorganik yang tersedia pada tanah ​

Berikut ini yang bukan manfaat Archaebacteria bagi kehidupan manusia adalah ....​

Pliss help me........​

BANTU guys pelajaran IPA​

bunga mawar berwarna merah mm disilangkan dengan bunga mawar warna putih mm tentukan nasil persilangan bunga mawar tersebut bila mawar merah dominan p … enuhtolong kak plis:)​

IPAmohon bantuannya kak​

Perhatikan tabel di bawah ini! Proses dan hasil dari proses tersebut yang ditunjukan oleh nomor 2 adalah ... Organ ekskresi Zat yang dikeluarkan P. Gi … njal 1. Karbondioksida a. Filtrasi - urine primer Q. Kulit 2. Urine (air seni) b. Reabsorpsi – urine primer R. Paru-paru 3.Cairan empedu c. Augemntasi – urine sekunder S. Hati 4. Keringat d. Reabsorpsi – urine sungguhan Pasangan organ ekskresi dengan zat yang 3. Beberapa dampak akibat gangguan pada sistem dikeluarkannya ditunjukan ... ekskresi! a. P-2 dan Q-4 c. R-4 dan S-1 1) Peradangan pada nefron. b. Q-1 dan R-3 d. S-3 dan P-4 2) Terganggunya pertukaran karbondioksida 2. Gambar organ ginjal! dan oksigen di dalam alveolus. 3) Gula darah tinggi. 4) Sering buang air kecil. Dampak yang ditimbulkan oleh penyakit diabetes melitus adalah ... a. 1) dan 2) c. 1) dan 3) b. 2) dan 3) d. 3) dan 4) 1​

Anodontia adalah kelainan yang disebabkan oleh gen resesif a yang terpaut kromosom X. Perkawinan antara ayah dan ibu yang belum diketahui fenotip dan … genotipnya menghasilkan 4 keturunan yaitu perempuan carrier, perempuan anodontia, laki-laki normal, dan laki-laki anodontia. Berdasarkan informasi tersebut maka dapat disimpulkan bahwa … . A. Ibu carrierB. Ayah normalC. Genotif ayah dan ibu samaD. Genotif ibu homozigot resesifE. Genotif ayah homozigot dominan​

1. Biofuel: a) bioetanol b) biodiesel2. Biogas3. Sel surya (Solar Cell)4. Pembangkit Listrik Tenaga Air (Hydropower)5. Pembangkit Listrik Tenaga Pasan … g Surut Air Laut dan Ombak (Ocean Power)6. Pembangkit Listrik Tenaga Angin (Wind Power)7. Geotermal8. Fuel Cell dan Hydrogen PowerDari ke 8 teknologi tersebut, manakah yang sesuai penerapannya untuk Indonesia, dan jelaskan!​

Petani Desa Sukamaju menanam padi pada bulan Oktober, apakah dampak yang dialami oleh petani jika curah hujan terjadi seperti pada diagram tersebut ? … *​

Seorang siswa mengamati seekor lebah yang ada di rumahnya. Ia mendapati bahwa lebah itu ialah seekor betina. Suatu hari ia melihat lebah tersebut ber … telur dan tidak lama telurnya pun menetas tanpa dibuahi oleh lebah jantan yang lain. Salah satu cara reproduksi lebah madu adalah telur tanpa dibuahi menjadi individu baru. Cara ini disebut …. A. parthenogenesisB. haploidC. metagenesisD. spermatogenesis​

Bagaimana cara menyesuaikan diri hewan pada gambar tersebut ​

berikut ini ciri ciri korban ketergantungan psikotropika 1.berhalusinasi 2.daya tahan tubuh melemah 3.tekanan darah menurun 4. denyut urat nadi melamb … at 5. mengalami rasa gembira berlebihan. ciri ciri korban ketergantungan psikotropika pengguna heroin adalah.. ​

Perhatikan bagan proses pembelahan sel secara mitosis berikut! Pernyataan yang tepat untuk menjelaskan proses yang terjadi pada fase telophase adalah … …    A Kromosom mengganda dan memadat, kemudian membran inti mulai rusak menjadi bagian-bagian kecil  B Kromosom berjajar pada bidang pembelahan, hingga siap membelah  C Membran inti Kembali bergabung membentuk dua sel anakan yang diploid    D Kromosom bergerak menuju kutub yang berlawanan hingga memiliki jumlah kromosom yang sama ​

Proses yang terjadi pada telinga bagian tengah adalah …    A Menangkap gelombang suara dan meneruskanefek getarannya ke rumah siput  B Mengumpulkan g … elombang suara dan mencegah debu maupun hewan kecil masuk ke telinga  C Mengubungkan ruang telinga tengah dengan rongga mulut serta sebagai alat keseimbangan    D Mengubah getaran suara menjadinimpuls saraf di dalam sel rambit kemudian diteruskan ke otak ​

Pembersihan pencemaran tanah dibagi menjadi 2 yaitu….Kolom 1A.menyapuB.remidiasi in-situC.dibabatiD.remidiasi ex-situE.dibakarF.menyapuG.remidiasi in- … situH.dibabatiI.remidiasi ex-situJ.dibakar​

1 Jelaskan peranan atau fungsi dari : a. pemulai : fungsi pemulai: b. komposel : fungsi komposel :​

Pemanasan global yang timbul karena meningkatnya efek gas rumah kaca diakibatkan oleh aktivitas manusia yang cenderung abai terhadapi kondisi lingkung … an. Kondisi ini berdampak pada perubahan sistem lingkungan yang dapat dirasakan secara global di setiap lini kehidupan kita. Salah satu dampak yang dirasakan oleh masyarakat di sekitar kita dari fenomena pemanasan global adalah …      A air dan udara yang tercemar dimana-mana      B perubahan perilaku manusia yang cenderung merugikan  C perubahan iklim yang tidak menentu     D meningkatnya daya beli produk ramah lingkungan ​

Lebih dari 100 tahun yang lalu, temperatur rata-rata suhu di permukaan Bumi meningkat sekitar?​

Dalam artikel sebelumnya, kita telah mengeksplorasi perbedaan antara antibodi kelinci dan tikus serta faktor biologis di balik keunggulan antibodi kelinci. Tetapi setelah memilih tipe inang, jenis teknologi yang digunakan untuk menghasilkan antibodi juga penting. Di sini, kami mengeksplorasi beberapa teknologi antibodi monoklonal kelinci yang tersedia di pasaran saat ini

Teknologi Fusi Hibridoma

Sejak pengembangan teknologi fusi hibridoma pada tahun 1975 oleh Georges Kohler dan Cesar Milstein, dan aplikasinya pada pengembangan antibodi monoklonal tikus, telah berdampak besar pada penelitian biomedis modern. Ini merupakan teknologi persiapan antibodi monoklonal tertua: untuk mengabadikan sel B yang mensekresi antibodi dengan menggabungkan limfosit B dan sel myeloma pada hewan yang diimunisasi. Cell line hibridoma yang mengeluarkan antibodi monoklonal kemudian dipilih menggunakan kloning pengenceran terbatas. Antibodi monoklonal diproduksi dalam skala besar dengan memperbanyak kultur strain sel.

Baca juga artikel mengenai Bagaimana Memilih Antibodi untuk Flow Cytometry di sini

Teknologi fusi sel hibridoma adalah teknologi yang paling banyak digunakan dalam pengembangan dan persiapan antibodi monoklonal tikus. Sejak 1980-an, para peneliti telah bekerja pada pengembangan antibodi monoklonal kelinci berdasarkan teknologi hibridoma. Namun, karena kurangnya cell line myeloma kelinci sebagai strain sel fusi, kemajuannya kurang menggembirakan. Oleh karena itu, para peneliti pendahulu juga mencoba membuat cell line  hibridoma fusi heterolog menggunakan cell line myeloma murine tikus dan limfosit B kelinci. Namun, metode ini ternyata kurang efektif karena efisiensi fusi rendah, ketidakstabilan genom dan cacat pada pasangan antibodi kelinci rantai berat-rantai ringan.

Abcam sebagai salah satu manufacture dan repositori antibodi terbesar di dunia, memiliki platform antibodi yang disebut RabMab® rabbit monoclonal antibodies. Kelebihan dari RabMab sendiri sebagai berikut:

• ‘Background’ yang rendah berkat pengikatan target yang ditingkatkan
• Memiliki spesifisitas tinggi
• Afinitas tinggi
• Sangat bagus untuk imunohistokimia/IHK karena sensitivitas tinggi tanpa kehilangan spesifisitas
• Ideal untuk deteksi modifikasi pasca-translasi
• Divalidasi dalam berbagai aplikasi seperti western blot, IHC, ICC, dan flow cytometry

Beberapa antibodi primer RabMAb® yang populer diantaranya sebagai berikut:

Saat ini Abcam menjual lebih dari 14.000 jenis antibodi primer RabMAb®. Lebih detail mengenai teknologi RabMAb® ini dapat ditemukan pada artikel berikut:
Kelebihan Antibodi Monoklonal Kelinci RabMAb® merk ABCAM

Teknologi display library phage

Pada tahun 1985, George Smith et al. menemukan bahwa gen pIII (mengkodekan protein miselia fag) dapat diubah oleh rekayasa genetika untuk mengekspresikan peptida atau sekuens protein yang berbeda tanpa mempengaruhi aktivitas dan fungsi infeksi fag. Penggunaan teknologi tampilan fag untuk skrining antibodi monoklonal dimulai pada awal 1990-an, dan fragmen scFv dan Fab dari antibodi target berhasil diskrining dengan membangun pustaka fag yang mengkode gen antibodi. Saat ini, teknologi tampilan fag masih merupakan metode utama yang digunakan untuk skrining fragmen scFv dan Fab.

Namun, teknologi tampilan fag ini masih memiliki beberapa kelemahan sebagai berikut:

1. Ini bergantung pada sistem ekspresi fag dan bakteri prokariotik, sehingga rantai antibodi yang berat dan ringan tidak serta-merta memiliki transkripsi, translasi, modifikasi pasca-translasi, pelipatan dan perakitan yang benar dalam sistem.
2. Pasangan rantai berat dan ringan dalam antibodi yang diproduksi menggunakan tampilan fag adalah pasangan buatan acak. Sama seperti teknologi tampilan lainnya (seperti teknologi tampilan sistem pada yeast/ragi), pemasangan tidak dapat benar-benar mencerminkan proses pemasangan rantai di lingkungan in-vivo yang alami.
3. Penapisan antibodi monoklonal dengan teknologi tampilan fag juga sangat tergantung pada kapasitas pustaka. Hanya dengan skrining pustaka antibodi dengan keragaman besar, ada kemungkinan mendapatkan antibodi monoklonal kelinci afinitas tinggi.
4. Dibandingkan dengan fusi hibridoma, persyaratan teknis jauh lebih tinggi untuk teknologi tampilan fag ini.

Teknologi gabungan NGS dan proteomik

Teknologi NG-XMTTM dikembangkan oleh Cell Signaling Technology pada tahun 2012. Teknologi ini menggabungkan next-generation sequencing (NGS) dengan proteomik. Antibodi diperoleh dari darah perifer hewan yang diimunisasi menggunakan antigen protein dan informasi urutan asam amino diperoleh dengan menggunakan spektrometri massa.

Namun, masih ada beberapa masalah teknis yang belum terpecahkan dalam metode ini, dan belum diperluas ke aplikasi komersial skala besar. Sebagai contoh, informasi pasangan rantai berat / ringan tidak dapat diperoleh dengan menggunakan spektrometri massa dan NGS. Selain itu, setelah mendapatkan informasi gen rantai berat dan ringan yang mengkodekan antibodi, teknik-teknik ini perlu diverifikasi dengan ekspresi rekombinan secara in vitro dan ini tentu saja memakan biaya yang cukup besar.

Teknologi skrining sel tunggal dan kloning

Pustaka tampilan fag untuk skrining antibodi monoklonal kelinci memiliki beberapa kelemahan yang disebutkan di atas, dan teknologi sel hibridoma tradisional masih memiliki efisiensi fusi yang rendah, stabilitas cell line hibridoma yang rendah, dan masih dilindungi dengan paten. Oleh karena itu, sejak awal 2000-an, para peneliti telah mengembangkan generasi baru teknologi pengembangan antibodi monoklonal kelinci yang tidak tergantung pada teknologi fusi hibridoma dan teknologi tampilan fag.

Produksi antibodi monoklonal kelinci dengan metode ini terutama melibatkan pemilihan limfosit B spesifik dengan melakukan flow cytometry multiwarna menggunakan marker  permukaan sel B dan kemudian mengkloning gen sel B tunggal rantai berat dan rantai ringan secara in vitro. Keuntungan dari metode ini ada dua. Yaitu pertama, seperti fusi hibridoma, pasangan rantai berat / ringan dari antibodi yang diperoleh sepenuhnya mencerminkan pasangan dalam kondisi alami. Kedua, sel B dapat diisolasi dari limfosit darah perifer, oleh karena itu prosedur skrining dapat dilakukan tanpa membunuh hewan.

Saat ini, metode yang paling umum digunakan untuk mendapatkan gen rantai berat dan ringan antibodi monoklonal yang sesuai dari sel B tunggal adalah direct-PCR dari sel B tunggal.

Secara umum, skrining sel tunggal dan kloning masih memiliki kelemahan berikut dalam aplikasi komersial:

1. PCR sel tunggal sangat teknis dan membutuhkan kondisi lingkungan yang sangat spesifik. Selain itu, lebih banyak siklus (umumnya> 50) atau beberapa siklus PCR diperlukan untuk secara efektif memperbanyak gen rantai berat dan ringan dari suatu antibodi. Oleh karena itu, kemungkinan mutasi yang dimediasi PCR pada gen target meningkat, dan antibodi fungsional pun bisa hilang.
2. Seperti halnya pada teknologi NGS yang telah dijelaskan di atas, informasi rantai berat / ringan yang diperoleh perlu diverifikasi juga dengan ekspresi rekombinan secara in vitro.
3. Karena antibodi komersial terhadap marker permukaan limfosit kelinci B masih jarang, kemurnian limfosit kelinci B yang diperoleh dengan skrining terbatas dan proporsi klon positif yang diperoleh lebih rendah.
4. Kloning gen antibodi dari sel tunggal dan verifikasi ekspresi rekombinan in vitro memakan waktu dan cukup menguras tenaga. Oleh karena itu, metode ini tidak cocok untuk skrining berkinerja tinggi.